Buffertkapacitet för gelfiltreringskolonn
Bakgrund: För reningen på gelfiltreringskolonnen ska du göra en buffert. Du tvekar mellan 20 mM Tris-HCL pH 7,0 och 0,1 M natriumvätekarbonatbuffert, pH 7,0. Vilken kommer att ha bäst buffertkapacitet ? Du vet att pKa för Tris-H+ är 8,07 och för H2CO3 är pKa1= 6,35 och pKa2=10,33
Jag tänker att man behöver ha ett pKa värde som är nära det pH man vill arbeta med. Men jag vet inte vilken som kommer ha bäst buffertkapacitet.
Tacksam för hjälp
Ju större koncentration man har av en viss buffert, desto bättre är buffertkapaciteten.
Ju närmare sitt pKa-värde pH är för en viss buffert, desto bättre är buffertkapaciteten.
Tack för svar!
Blir då Tris-HCL bufferten i detta fall bättre att använda då pKa värdet för Tris-H+ är 8,07, eftersom det är närmast pH 7,0?
Nu förstår jag inte hur du tänker. Dels är skillnaden mellan 7,0 och 6,35 betydligt mindre än skillnaden mellan 8,07 och 7,0 och dels är koncentrationen för vätekarbonatbufferten betydligt lägre än tris-bufferten, två argument för vätekarbonatbufferten. (Att det finns ett andra pKa-värde vid 10,33 spelar ingen roll.)
oj där tänkte jag fel! utgick från pk2 10,33. Tack så mycket för hjälpen :)
Tris-buffert vid pH 7.0 är inge vidare på att buffra ytterligare syra, då den bufferten fungerar bäst mellan pH 7-9.
Vätekarbonatbufferten vid 0.1 M (100mM) är betydligt mer koncentrerad än Tris-buffertens 20 mM, vilket skulle vara positivt. En krux är dock att vätekarbonaten står i jämvikt med fri koldioxid, som dunstar, men under antagandet att det är ett slutet system finns det mer bufferkapacitet i vätekarbonatbufferten.
