Gramfärgning
Jag har utfört en gramfärgning och försöker analysera resultaten. Jag antar att det små lila runda bakterierna är grampositiva vilket kan tyda på till exempel cocker. Men det jag inte är helt säker på är de rosa massorna och de lila kristallerna. Min lärare ansåg att det är svamp men samtidigt anser andra källor att det är kristallviolet. Vet någon om hur jag kan lösa detta?
De rosa cell liknande massorna tror jag kan vara gramnegativa celler eftersom en VRB-agar platta med vatten från samma vatten prov fick ett ganska högt värde vilket tyder på att provet inn
ehöll en viss det gramnegativa bakterier så som E-coli.
Jag har själv aldrig gjort gramfärgning, så ta därför inte mitt svar som om det vore 100% sant. Men jag tänker mig att det rimligen finns någon form av referenstabell med olika färger och vilken typ av bakterier det representerar?
De rosa cellerna är inte riktigt färgade av kristallviolett. När celler färgas med kristallviolett blir de verkligen lila. Celler som är gram-negativa får istället en rosa färg. Jämför med bilden nedan (från Wikpedia), som visar färgningen:
De lila kristallerna är helt enkelt kristaller av ämnet kristallviolett. Kristallviolett löser sig inte så bra i vatten, man brukar använda lösningar mellan 0.1-1% i vatten, och denna används sedan för att färga t.ex. bakterier och därmed späda ytterligare. Ökar koncentrationen (t.ex. genom att vätskan dunstar, d.v.s. volymen minskar) kommer kristallviolett att börja bilda kristaller, som verkligen är lila. Eller om man använder en färglösning med t.ex. etanol i kan denna göras med en betdligt högre koncentration, eftersom etanolen hjälper till att lösa kristallviolett i vattnet. Men när denna färg med etanol blandas med provet (som kanske var i en vattenlösning) kommer koncentrationen av etanol bli för låg, så att koncentrationen av kristallviolett blir för hög - och kristallerna bildas.
Att det är kristaller kan man uttyda från hur de ser ut i din bild där kristallerna har:
- skarpa kanter, motsvarande tunna kvadratiska stavar (kristaller växer regelbundet och ofta med skarpa kanter, det gör inte celler)
- de har vuxit rakt, d.v.s. inga vågiga kanter eller böjda sidor (kristaller växer efter ett ordnat geometriskt mönster, celler är mer ojämna och även om de växer tillsammans blir utseendet lite svängt)
- Om du tittar på t.ex. de två högst upp till vänster ser du att de har ett gemensamt centrum, ett origo i mitten av den nästan bolliknande formen. Det är i denna "mitt" som en kristall började bildas, och börjat växa samtidigt som flera andra stavar börjat bildas.
Om det finns gram-positiva celler är lite svårare att utesluta, för det skulle kunna finnas gram-positiva rejält lilafärgade celler bland/under kristallerna. Och man kan argumentera för att det är svårt att urskilja och därmed eliminera gram-positiva celler. Dock borde det finnas sådana celler lite överallt i bilden, vilket det inte gör (liknande i bilden från wikipedia). Så det talar emot att det finns gram-positiva celler i just detta prov.
