2 svar
23 visningar
LoWe är nöjd med hjälpen
LoWe 54
Postad: 24 mar 17:06

Restriktionsenzym och plasmider

Jag har snart prov och har nu fastnat på följande instuderingsfråga:

"Varför måste man klippa upp en plasmid med samma restriktionsenzym som man använde för att klippa ut det DNA som man vill föra in i en bakterie?" 

Kan det möjligtvis vara så att restriktionsenzymet vet om i vilken sekvens den har klippt i DNA och då vet var den kommer att passa in i plasmiden? Eller har jag fel?

Finns det någon där ute som kan vara snäll och hjälpa mig?

mag1 2033
Postad: 24 mar 20:00 Redigerad: 24 mar 20:04

Precis. Om du klipper ut en bit DNA som du sen vill stoppa in i plasmiden (A i figuren) med restriktionsenzym som ger klibbiga överhäng (sticky ends på engelska) kommer dessa klibbiga överhäng att passa ihop motsvarande klibbiga överhäng i din klyvda plasmid (längst ner i B delen av figuren) - men bara om du använder samma restriktionsenzym.

Oftast används två olika restriktionsenzym, så du får ett unikt klibbigt överhäng i ena änden av din DNA bit och ett annat i den andra änden, och motsvarande i din plasmid - då kan din DNA bit bara passa in på ett sätt (som i figuren nedan där HindIII och KpnI används).

 

 

 

 

 

Adressen jag tog bilden ifrån.

LoWe 54
Postad: 24 mar 20:04

Tack nu förstår jag!

Svara Avbryt
Close