Vätskekromatografi
Hej, är verkligen i behov av hjälp angående denna fråga (och en annan tidigare om kapillärelektrofores som finns i en annan tråd).
Du vill separera toluen (C6H5CH3) och 2-metylfenol (C6H4CH3OH) med LC. Se kromatogram nästa blad, substans 1 är toluen och substans 2 är 2- metylfenol. Beskriv kromatogram a-c med korrekta begrepp och förklara utförligt skillnaderna.
Jag vet att 2 metyl fenol är en svag syra. Den är även polärare en toluen tack vare dess OH - grupp.
Jag vill veta:
- Hur metanol och förhållandet mellan buffert och organiskt lösningsmedel påverkar ämnenas retentionstider.
- Då 2 metyl fenol är polärt bör det bättre binda till den polära mobila fasen är toluen. Ändå har toluen en lägre retentionstid. Varför då?
Kort retentionstid = kort tid i kolonnen, analyten åker rakt igenom. Om den har hög affinitet för stationära fasen kommer den stanna i kolonnen längre.
Jämför vi a, b och c, ser vi att metylfenolet får längre och längre retentionstid. Givet att det är samma kolonn på samtliga experiment, beror detta på att vi sänkt halten metanol i den mobila fasen med a som har högst metanolhalt, och c som har lägst metanolhalt.
Anledningen till att toluenet alltid kommer ut först verkar bero på att inte har särskilt hög affinitet för vare sig den stationära eller mobila fasen.
Jag saknar information om både den fasta fasen och den rörliga fasen. Vet du vad de består av, eller är det meningen att du ska dra slutsatser om det i dina svar?
Detta är det enda vi får veta. Vad är affinitet? Om vi sänker halten metanol, kommer den mobila fasens polaritet att öka eller minska? Metylfenol är polärare än toluen. Om dess retentionstid ökar bör ju den mobila fasen bli mindre polär då metanolhalten sänks? Kan det vara en förklaring till att metylfenolets retentionstid ökar.?
Jag är förvirrad. Borde inte metylfenolet ha en kortare retentionstid än toluen då det bör binda bättre till den polära mobila fasen än toluen? Tänker jag rätt?
Juste, glömde också följande information:
(a) Du börjar med en mobilfas bestående av 20% metanol och 80% buffert.
(b) Du sänker halten metanol i mobilfasen till 15% (85% buffert).
(c) Du sänker pH i bufferten, men fortfarande 15% metanol / 85% buffert.
Flödeshastigheten är samma i alla tre fall.
Jag ber om ursäkt! Kanske blir enklare att svara på mina frågor nu :)
Anonym_15 skrev:Detta är det enda vi får veta. Vad är affinitet? Om vi sänker halten metanol, kommer den mobila fasens polaritet att öka eller minska? Metylfenol är polärare än toluen. Om dess retentionstid ökar bör ju den mobila fasen bli mindre polär då metanolhalten sänks? Kan det vara en förklaring till att metylfenolets retentionstid ökar.?
Kan det också vara så att då pH minskar i tredje fallet kommer syran att befinna sig mer i sitt oladdade tillstånd och då fastna mer på den stationära fasen. Därav högre retention?
