Tunnskiktskromatografi med aminosyror
Hej!
Jag har utfört en tunnskiktskromatografi med aminosyrorna lysin, prolin, leucin, glycin, alanin och asparaginsyra. Den stationära fasen bestod av en tunnskiktsplatta med beläggning av cellulosa, och den mobila fasen av 2-propanol, metyletylketon och saltsyra (konc ).
Mitt resultat såg ut såhär:
Från vänster till höger representerar varje prick lysin, prolin, leucin, glycin, alanin och asparaginsyra.
Jag förstår inte riktigt varför det blev som det blev. Att det har med ämnenas tendens att binda till den stationära respektive mobila fasen förstår jag, men vad som styr den tendensen finner jag svårt att förstå.
- Spelar pH och Ip någon roll? Lysin hade ju en relativt hög Ip.
- Uppstår det vätebindningar mellan aminosyror och cellullosa?
- Innebär lysins "avlånga" sidokedja att det skulle kunna uppstå v.d.W-bindningar till cellulosan?
- De tre som åkte längst var "opolära" aminosyror, men borde det inte ha varit tvärtom eftersom större delen av elueringsvätskan var polär?
Cellulosa är polärt.
Ja, pH spelar roll. Förstår du varför lysin har en hög isoelektrisk punkt när man tittar på dess struktur? Hur kommer lysin att se ut i din buffert?